摘 要
    本实验就不同的培养液（M199、mDPBS、TYH）和培养液添加物对小鼠C级卵母细胞体外成熟的影响进行了研究。实验结果表明：①mDPBS培养液〔19.8%（GVBD）、12.3%（PBI）〕的成熟效果好于M199培养液〔13.3%（GVBD）、8.9%（PBI）〕和TYH培养液〔12.3%（GVBD）、7.4%（PBI）〕（P＜0.05）。②mDPBS中添加丙酮酸钠和FCS〔100%（GVBD）、86.3%（PBI）〕明显优于单纯添加丙酮酸钠〔42.9%（GVBD）、23.8%（PBI）〕，也优于添加丙酮酸钠+BSA〔63.2%（GVBD）、53.8%（PBI）〕（P＜0.01）。③就A、B和C级三种卵母细胞相比，C级卵母细胞的成熟发育最佳，GVBD的发生率为100.0% ，PBI的排出率为86.2%。
关键词：小鼠；卵母细胞；体外成熟；培养环境

Abstract
        In the test,the different culture medium（M199、mDPBS、TYH） and additictive are adopted for culturing C grade oocytes of kunming mouse respectively .The results show that the mature effect mDPBS〔19.8%（GVBD）、12.3%（PBI）〕is better than M199〔13.3%（GVBD）、8.9%（PBI）〕and TYH〔12.3%（GVBD）、7.4%（PBI）〕（P＜0.05）。Furthermore,Pyruvic and sodium、FCS and BSA are added in basic medium of mDPBS for culturing C grade oocytes of kunming mouse.The test show that the mature of mDPBS+Pyruvic and sodium+FCS〔100%（GVBD）、86.3%（PBI）〕mDPBS+Pyruvic and sodium+BSA〔63.2%（GVBD）、53.8%（PBI）〕（P＜0.01）.In addition, mDPBS+ Pyruvic and sodium+FCS is adopted for culturing different grades oocytes.The result indicated that the mature effect of C grade oocytes〔100%（GVBD）、86.2%（PBI）〕is better than A grade oocytes〔63.2%（GVBD）、53.8%（PBI）〕and B grade oocytes〔63.2%（GVBD）、53.8%（PBI）〕.
Key word: mouse；oocytes；in vitro maturation；culture envirionment
 
目录
摘 要 1
Abstract 1
前言 3
1　实验材料与方法 5
1.1  实验材料 5
1.1.1　实验动物 5
1.1.2　实验用的主要仪器 5
1.1.3　实验用的主要试剂 5
1.1.4　基础液 5
1.1.5　冲卵液 6
1.1.6　培养液 6
1.2  实验方法 7
1.2.1  小鼠的处死及其卵母细胞的获取 7
1.2.2　检卵 7
1.2.3　培养 7
1.2.4  观察 7
2   实验结果 7
2.1　成熟培养液对小鼠卵母细胞成熟发育的影响 7
2.2　培养液添加成分对小鼠卵母细胞成熟发育的影响 8
2.3　不同类型卵母细胞在mDPBS培养液中的发育能力 8
3　讨  论 9
3.1　培养液对小鼠卵母细胞体外成熟的影响 9
3.2　培养液添加成分对小鼠卵母细胞体外成熟的影响 9
3.3　卵子类型对卵母细胞成熟发育的影响 9
参 考 文 献 10

前言
    哺乳动物体外受精研究已有一百余年的历史。早在1878年,澳大利亚科学家Schek就用兔进行过实验。1935年，Pincus和Enzmin首次观察到离开卵泡的兔卵母细胞可在没有促性腺激素的培养条件下自动恢复和完成减数分裂[1]。自从他们发现有腔卵泡中的卵母细胞在体外培养可以自发成熟这一事实以来，人们在卵母细胞体外成熟方面做了大量的工作，已成功地使多种哺乳动物的卵母细胞在体外成熟、受精以及受精卵在体外继续发育[2]。1959年张明觉成功使兔卵母细胞体外受精并产仔，获得世界首例的“试管动物”------试管兔。1965年，Edwards通过研究小鼠、绵羊、牛、猪、猕猴和人的卵母细胞体外成熟，发现卵母细胞离开卵泡环境后的自发核成熟是哺乳动物的普遍现象。1968年，Wittingham[3]获得体外受精“试管小鼠”，1982年，Epping[4]等对小鼠腔前卵泡进行了体外成熟和体外受精研究，并成功产仔。国内，陈秀兰等[5]于1986年成功获得“试管小鼠”。关于人的卵母细胞体外受精的研究，Echwards等在1969年就有过报道。通过几十年的不懈努力，卵母细胞的成熟系统已日趋完善，先后有30多种哺乳动物的体外受精后代诞生[6]。